高脂血症遗传检测流程

高脂血症的遗传检测是一个涉及多个步骤的过程，主要包括以下几个环节：

1. 提取DNA模板

首先，需要从患者的血液、其他体液或细胞中提取DNA模板。这个过程通常需要用到DNA提取试剂盒，该试剂盒包括特异性引物及测序引物，用于检测APOE基因上C112R(rs429358)和R158C(rs7412)、LPL基因上HindⅢ(rs320)以及MTHFR基因上C677T(rs1801133)的4个单核苷酸多态性位点基因型。

2. PCR扩增反应

接下来，使用PCR反应体系进行PCR扩增反应。该体系包括TaqDNA聚合酶、dNTP混合液、PCRbuffer和ddH2O；反应条件为：94℃预变性3min，94℃变性30秒，退火30秒，72℃延伸1min，扩增35个循环，72℃最后延伸10min，保存于4℃。

3. PCR扩增产物纯化

PCR扩增产物需要进行纯化处理，这一步骤使用的是PCR产物纯化体系，包括SAP酶、ExoI酶和ddH2O；在PCR扩增仪上进行反应，反应条件为37℃15min,72℃20min。

4. DNA测序

纯化后的PCR扩增产物进行DNA测序。测序反应体系包含PCR纯化产物、25%BigDyemix、3.2uMDNA测序引物、去离子水；在PCR扩增仪上进行反应:98℃2min,进行25个循环的96℃30秒,55℃30秒,60℃4min;反应结束后加入125mMEDTA溶液和100%乙醇溶液于室温下沉淀15min;在4℃下,3600rpm/min离心30min,轻轻倒去上清液,加入70%乙醇溶液,3600rpm/min离心15min,倒去上清液,室温放置20min后,加入HIDI溶液,放入测序仪中。

5. 基因型分析

最后，通过测序图谱即可直接读出SNP位点基因型。

需要注意的是，高脂血症虽然可能存在遗传因素的影响，但它主要还是后天生活习惯导致的疾病。因此，即使有遗传倾向，通过改善生活习惯也可以有效地预防和控制高脂血症的发生。